基因療法一直被認為有能力治療遺傳病，但是在實際的應用中一直存在問題，即健康的基因只能在幾周內發揮作用，最終只能對基因進行短暫恢復。

　　在近幾年進行病毒運送基因到細胞的研究中，曾有人實現通過運送健康基因達到減輕病癥的效果，但是一直無法實現將基因準確插入到指定的DNA位置。

　　CRISPR/Cas9基因編輯技術能夠解決這項難題。雖然CRISPR/Cas9在如今的使用中仍然存在問題，但是和其他基因編輯技術相比，它能夠實現基因編輯的重組。在使用過程中，科學家通過指定CRISPR/Cas9對應的靶DNA片段，以及要取代的DNA序列和取代的DNA序列，實現最終的基因編輯。

　　CRISPR/Cas9還需解決的問題是尋找DNA的位置問題，針對這個問題，已經存在將CRISPR/Cas9和病毒運送方法進行結合，利用CRISPR/Cas9作為導航員和編輯器，在CRISPR/Cas9到達靶位置上時，實現基因序列的插入的研究。該研究人員表示，在利用CRISPR/Cas9實現病毒靶向時候，如果在不太活躍的DNA片段進行，能夠降低基因編輯帶來的潛在風險。

　　CRISPR/Cas9這一被稱為“魔剪”的基因編輯工具在基因工程應用方面被寄予厚望。但是，脫靶效應這一有爭議的老問題一直影響著CRISPR/Cas9系統的應用。

　　有文獻報道，CRISPR/Cas9的切割是通過gRNA與基因組位置之間20bp堿基的配對，且配對堿基的 5′ 端需要有PAM結構，再引導Cas9作用實現的，但是CRISPR/Cas9與靶位點識別的特異性主要依賴于gRNA與靠近PAM處10-12bp堿基的配對，而其余遠離PAM處8-10bp堿基的錯配對靶位點的識別影響不明顯，這項研究直接說明了CRISPR/Cas9存在嚴重的脫靶性，即該技術可以發生非特異性切割，引起基因組非靶向位點的突變，這樣會造成研究結果的不確定性。

　　去年在Nature Methods雜志上發表的研究“Unexpected mutations after CRISPR-Cas9 editing in vivo”通過全基因組測序分析表明CRISPR基因編輯會引入數百種不可預估的突變到基因組中，文章所指出的大規模脫靶問題，對CRISPR的應用提出了尖銳的挑戰，卻又在今年3月30日出現反轉并進行了撤稿處理。值得注意的是，這篇文章的第一作者Kellie A Schaefer和共同第一作者Wen-Hsuan Wu均同意撤稿，而包括通訊作者Alexander G Bassuk以及Vinit B Mahajan在內的其余四位作者則不同意撤稿。這與通常的撤稿情況還是有所不同，一般的撤稿大多數情況貌似都是通訊作者要撤稿，這篇爭議性文章通訊作者則堅持了自己的意見。顯然，這篇文章在研究者們內部也有巨大分歧。

　　同時，也有一些研究表明，CRISPR的脫靶問題沒有這些研究表示的那樣嚴重：bioRxiv期刊上的研究“Whole genome sequencing of multiple CRISPR-edited mouse lines suggests no excess mutations.”指出，一些采用CRISPR/Cas9技術進行基因編輯的小鼠品系經過全基因組測序后的結果顯示，CRISPR/Cas9技術能夠在生物水平上對基因組實現精準編輯，同時沒有造成很多的脫靶突變。

　　從這些研究可以分析，在中對CRISPR/Cas9技術進行應用時，脫靶效應仍然需要列入考慮中。